基因治疗已成为一种强有力的手段, 通过非病毒或病毒载体将基因治疗药物递送到靶细胞中, 改变各种组织的基因表达, 从而治疗遗传性疾病。目前, 已有多种核酸类物质被用作基因治疗药物或疫苗, 包括反义寡核苷酸 (ASO) 、小干扰RNA (siRNA) 、适配体 (Aptamer) 和信使RNA (mRNA) 等。
质粒 (pDNA) 在制造mRNA以及其他基因治疗药物方面发挥着重要作用。质粒具有多种拓扑结构, 包括超螺旋、开环和线性形式。其中, 超螺旋质粒对细胞转染效率和治疗效果具有显著影响。
腺相关病毒 (AAV) 因其对人体无致病性、低免疫原性和长期基因表达特性, 而成为体内基因治疗中广泛使用的载体。在AAV生产过程中, 病毒滴度、衣壳含量和聚集状态被认为是潜在的关键质量属性 (CQAs) ,影响着AAV基因治疗产品的纯度、效力和安全性。
DNA 质粒 mRNA AAV
高效液相色谱法｜HPLC
高效液相色谱法 (HPLC) 无疑是分析寡核苷酸和AAV关键质量属性的重要技术之一, 具有高选择性、高灵敏度、高通量和可重复性等优点, 可确保基因治疗药物的有效性和安全性。目前常使用以下三种分离模式：
✦体积排阻色谱 (SEC) 常用于分析mRNA、质粒和AAV中存在的聚集体含量；
✦离子交换色谱 (IEX) 常用于分析质粒的拓扑结构形式和AAV衣壳含量；
✦离子对-反相色谱 (IP-RP) 常用于测定小核酸和mRNA纯度。
基因治疗药物分析利器—DNACore系列色谱柱
1 DNACore SEC色谱柱
DNACore SEC是基于特制的高强度、单分散二氧化硅微球, 采用先进的表面键合与修饰技术, 经优化装填工艺而成的高性能体积排阻色谱柱。DNACore SEC色谱柱适用于分离腺相关病毒 (AAV) 、信使RNA (mRNA) 、环状RNA和质粒及其聚集体, 在基因治疗领域具有广泛的应用场景。
参数
1.1 不同血清型AAV聚集体分析
1.2 环状RNA纯度分析
1.3 质粒聚集体分析
2 DNACore IEX色谱柱
DNACore IEX是基于单分散无孔聚合物微球, 采用先进的表面键合与修饰技术, 经优化装填工艺而成的高性能离子交换分析色谱柱, 适用于AAV空实比、小核酸纯度和质粒拓扑结构的分析。
参数
2.1 不同血清型空壳/实心率分析
2.2 质粒拓扑结构含量分析 (4 kbp)
2.3 质粒拓扑结构含量分析 (8 kbp)
3 DNACore RP色谱柱
DNACore RP是基于单分散微球, 采用先进的表面键合与修饰技术, 经优化装填工艺而成的高性能离子对-反相色谱柱, 专为基因治疗样品（包括小核酸、mRNA、质粒和病毒等）液相色谱分析而设计。
参数
3.1 小核酸纯度分析
3.2 mRNA含量分析
4 小结
DNACore系列色谱柱包括三种分离模式: 体积排阻 (SEC) 、离子交换 (IEX) 和离子对-反相 (IP-RP) , 为病毒、mRNA、质粒和小核酸等分析提供完整工具包。
产品货号
#部分常规规格色谱柱货号#
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